Repositório Institucional POSITIVO Universidade Positivo Dissertação Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Industrial
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Tipo: Dissertação
Título: Identificação de leveduras isoladas da rizosfera de Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb e avaliação do seu potencial de degradação de petróleo
Autor(es): Santos, Jéssica Janzen dos
Primeiro Orientador: Maranho, Leila Teresinha
Resumo: O petróleo constitui atualmente a principal fonte energética mundial, sendo previsto o aumento na sua demanda nos próximos anos. Da mesma forma, acidentes como derrames, vazamentos e passivos decorrentes do refino do petróleo, crescem na mesma proporção e provocam a contaminação de ecossistemas terrestres e aquáticos, podendo o petróleo persistir por longos períodos no ambiente. Diante desses fatos, torna-se necessário o tratamento e o desenvolvimento de técnicas que possam reduzir ou, até mesmo, eliminar os contaminantes. Entre as técnicas de tratamento, a biorremediação se destaca por ser um método simples, eficiente, de baixo custo e menos agressivo quando comparada às técnicas comumente usadas. É caracterizada pelo uso de microrganismos que possuem a capacidade de degradar, eliminar ou transformar poluentes presentes no meio em compostos, frequentemente, menos tóxicos. Esses microrganismos podem ser selecionados das raízes de plantas fitorremediadoras que, no caso do petróleo, proporcionam condições favoráveis ao crescimento dos mesmos, aumentando a aeração e, por consequência, a biodegradação de contaminantes, processo conhecido como rizodegradação. Sendo assim, a presente pesquisa teve como objetivo fazer a identificação molecular por sequenciamento de nucleotídeos e amplificação por reação de cadeia da polimerase (PCR) de DNA duas leveduras isoladas da rizosfera de Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb., e realizar testes individuais para avaliar o potencial de degradação de hidrocarbonetos de petróleo para fins de bioprospecção e aplicação biotecnológica. Os testes foram realizados em meio mineral acrescido de petróleo como única fonte de carbono, sob diferentes intervalos de tempo (0, 24, 48, 72 e 96h). Os parâmetros de temperatura, potencial hidrogeniônico (pH), condutividade elétrica (CE), densidade óptica (DO) foram analisados, bem como o perfil de hidrocarbonetos por cromatografia gasosa (CG). As leveduras previamente rotuladas como morfotipo L1 e morfotipo L2 foram identificadas como: Rhodotorula glutinis e Sporidiobolus pararoseus, respectivamente. O resultado do teste individual de degradação de petróleo com R. glutinis revelou crescimento de biomassa no tempo 24h com um percentual de degradação de 59,57, 72,34, 63,52, 68,94, 77,96, 78,99, 58,38, 68,43, 44,74, 61,49, 46,13 e 66,49% dos compostos de petróleo. O resultado do teste individual de degradação de petróleo com S. pararoseus revelou que, apesar da densidade óptica demonstrar que houve crescimento de biomassa nos tempos 48h e 72h, as análises de cromatografia revelaram que não houve degradação dos compostos de petróleo. Como resultado da presente pesquisa espera-se, contribuir para a problemática não somente de solo contaminado com petróleo, mas de outros ambientes afetados por ele. Esses resultados ajudam a preencher a lacuna entre o campo da biorremediação e das abordagens laboratoriais fornecendo uma visão sobre os processos de recuperação ambiental, pois não existe trabalhos na literatura que relatem o uso dos microrganismos Rhodotorula glutinis e Sporidiobolus pararoseus para a degradação de petróleo.
Abstract: Petroleum is currently the world's main energy source, and its demand is expected to increase in the coming years. Likewise, accidents such as accidental spills, leaks and liabilities arising from the refining of oil grow at the same rate and cause contamination of terrestrial and aquatic ecosystems, and oil may persist for long periods in the environment. Faced with these facts, it is necessary to treat and develop techniques that can reduce or even eliminate contaminants. Among the treatment techniques, bioremediation stands out as being a simple, efficient, low-cost and less aggressive method when compared to commonly used techniques. It is characterized by the use of microorganisms that have the ability to degrade, eliminate or transform pollutants present in the environment into compounds, often less toxic. These microorganisms can be selected from the roots of phytoremediation plants which, in the case of petroleum, provide favorable conditions for their growth, increasing aeration and, consequently, the biodegradation of contaminants, a process known as rhizodegradation. Thus, the present research had as objective to make the molecular identification by nucleotide sequencing and amplification by DNA polymerase chain reaction (PCR) two yeasts isolated from the rhizosphere of Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb., and to carry out individual tests for evaluate the potential for the degradation of petroleum hydrocarbons for bioprospecting and biotechnological application. The cultivations were performed in mineral medium plus petroleum as the only source of carbon, under different time intervals (0, 24, 48, 72 and 96h). The parameters of temperature, hydrogenation potential (pH), electrical conductivity (EC), absorbance at 610 nm by optical density (OD) were analyzed, as well as the hydrocarbon profile by gas chromatography (GC). Yeasts previously labeled as L1 morphotype and L2 morphotype were identified as: Rhodotorula glutinis and Sporidiobolus pararoseus, respectively. The results of the individual oil degradation test with R. glutinis revealed 24h time biomass growth with a degradation percentage of 59.57, 72.34, 63.52, 68.94, 77.96, 78.99, 58.38, 68.43, 44.74, 61.49, 46.13 and 66.49% of the petroleum compounds. The result of the individual petroleum degradation test with S. pararoseus revealed that, although the OD showed that biomass growth occurred in 48h and 72h times, the chromatographic analysis showed that there was no degradation of the petroleum compounds. As a result of the present research, it is hoped to contribute to the problem not only of soil contaminated with oil, but of other environments affected by it. These results help fill the gap between the field of bioremediation and laboratory approaches by providing an insight into the processes of environmental recovery, as there are no papers in the literature that report the use of the microorganisms Rhodotorula glutinis and Sporidiobolus pararoseus for the degradation of petroleum.
Palavras-chave: Biotecnologia
Petróleo
Biorremediação
Proteção ambiental
Leveduras
CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Positivo
Sigla da Instituição: UP
Departamento: Pós-Graduação
Programa: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Industrial
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2255
Data do documento: 2017
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